羊布鲁氏菌M5株P39基因的克隆与分析鉴定

郑源强；刘超；张明；韩新荣

关键词：羊布鲁氏菌, P39基因, 克隆, 鉴定

摘要：目的:从羊布鲁氏菌M5株全基因组中扩增P39基因,并对扩增产物进行序列测定与分析鉴定.方法:试剂盒法提取羊布鲁氏菌全基因组,设计特异性引物通过PCR方法扩增P39基因,将扩增产物连接到T载体(pMD19 - T)的多克隆位点(MCS)中,构建成重组体(pMD19 -T - P39).将该重组体转化感受态大肠杆菌DH5(,经克隆筛选并扩增后,采用试剂盒法提取重组质粒,对该重组质粒进行酶切鉴定、序列测定并与GenBank数据库进行比对分析.结果:经PCR方法成功地从羊布鲁氏菌基因组中扩增得到了目的基因片段；酶切鉴定、序列测定与比对结果表明,该目的基因片段即是羊布鲁氏菌P39基因.结论:成功地从羊布鲁氏菌M5菌株全基因组中通过PCR扩增获得了P39基因,为后续的研究提供了可靠的基础.