期刊简介
本刊刊登校内、外有关基础医学、临床医学、预防医学和药学的论著、经验交流、综述等方面的文稿。
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首页>内蒙古医科大学学报杂志
- 杂志名称：内蒙古医科大学学报杂志
- 主管单位：内蒙古医科大学
- 主办单位：内蒙古医科大学
- 国际刊号：2095-512X
- 国内刊号：15-1364/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：国际药学文摘, 维普收录(中), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中)
羊布鲁氏菌omp25基因原核表达载体的构建与鉴定
石艳春；韩堃；郑源强；吴岩；毕力夫
关键词：羊布鲁氏菌, OMP25, 原核表达载体, 克隆, 鉴定
摘要：目的:利用PCR反应从羊布鲁氏菌基因组DNA中克隆omp25基因,并将其构建到原核表达载体pET -32a中.方法:试剂盒法提取羊布鲁氏菌基因组DNA,设计合适的引物,通过PCR反应从基因组中扩增外膜蛋白OMP25的编码基因(omp25).将得到的基因片段连接到克隆载体pMD19 -T的多克隆位点(MCS)中,将连接体pMD19 -T - omp25转化感受态大肠杆菌DH5(并进行筛选和克隆扩增,提取质粒并进行酶切分析与序列测定.利用酶切与连接反应将目的基因( omp25)插入载体pET -32a的多克隆位点中,将连接体pET -32a -omp25转化感受态大肠杆菌DH5(并进行筛选和克隆扩增,提取质粒并进行酶切分析.结果:PCR扩增得到的基因片段与GenBank中已公布的羊布鲁氏菌omp25基因同源性为99％.酶切分析结果表明,omp25基因成功地插入载体pET -32a中.结论:成功地扩增得到了羊布鲁氏菌omp25基因并构建了携带该基因的重组原核表达载体pET-32a-omp25,为后续的研究提供了可靠的基础.
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